液體培養基接種方法解讀
更新時間：2022-09-05 瀏覽次數：2806
液體培養基（liquidculturemedium），固體培養基的對應詞，是微生物或動植物細胞的液狀培養基。它具有進行通氣培養、振蕩培養的優點。在靜止的條件下，在菌體或培養細胞的周圍，形成透過養分的壁障，養分的攝入受到阻礙。由于在通氣或在振蕩的條件下，可消除這種阻礙以及增加供氧量，所以有利于細胞生長，提高生產量。
試管液體接種
試管液體接種是將一定體積的樣品混懸液加入到盛有指/定液體培養基的試管內，或將一定體積、按標準規定條件下培養過的培養液接入盛有指/定液體培養基的試管內（有時是指接種環取一環，或移液管移液器移取一定的體積，例如0.1ml、1ml等）。涉及試管液體接種的操作有MPN法檢測大腸菌群/大腸桿菌，以及沙門氏菌、單增李斯特氏菌的二次增菌轉接操作等。
此處以用移液器將一定體積的樣品混懸液接入到盛有指/定液體培養基的試管內為例，
①用酒精棉消毒操作臺面。將移液器吸頭盒放入酒精燈右側，靠近酒精燈放置。將需要進行液體轉接的試管插在試管架上，置于酒精燈左邊左手附近。將移液器調至合適的刻度放于右手附近的架子上。廢物缸放于右手能觸及的范圍內。
②點燃酒精燈，左手于酒精燈火焰附近打開移液器吸頭盒，右手持移液器用力插取吸頭兩下以防吸頭松動脫落，拔出移液器并蓋上移液器吸頭盒盒蓋。左手取待轉接液體試管，試管底部位于左手手心，移液器吸頭和試管口應在酒精燈火焰周圍的無菌區域之內。
③將試管伸向右手。右手食指，中指，無名指握住移液器，拇指靠在移液器按鈕上，小指和掌心下緣合圍夾住試管帽并用力拔出。如果操作者的手比較小，可以靠食指無名指和小指握住移液器，拇指仍靠在液體按鈕上。而中指向外伸，靠中指內側和食指、無名指外側夾住試管帽。將試管口和移液器吸頭靠近火焰，試管口灼燒一周，在火焰附近將吸頭剛好伸入試管口，抵住試管內壁下側，同時按住移液器按鈕至一檔（輕微推不動）。不要將移液器吸頭伸到試管底部，而應傾斜試管使液面傾斜至試管口附近并沒過吸頭尖/端。右手拇指緩慢松開，使液體緩緩吸入洗頭，注意不要吸入空氣。如果有空氣吸入，必須將液體壓回試管重新吸取。當右手拇指*松開時，撤離移液器，注意吸頭需盡量一直圍繞在在酒精燈火焰附近，并且吸頭務必保持向下姿勢以防止液體倒流入移液器內部引起污染。
④吸完液體后，將移液器撤離試管，移液器吸頭移到酒精燈火焰的遠離操作者的一側，將試管口在火焰上灼燒滅菌。
⑤滅菌后，右手小指迅速將試管帽蓋上，此時移液器吸頭仍然要在火焰形成的無菌區域內，不可離酒精燈火焰太遠。蓋上試管帽將試管歸位。
⑥左手取待轉接入液體的試管，右手保持移液器吸頭在酒精燈火焰附近。
⑦右手保持握移液器姿勢取下試管帽并灼燒管口。將吸頭抵靠在試管口的內壁上，緩緩推動移液器按鈕至底（*推至第二檔，使殘存在吸頭尖/端的液體也流出）。推出液體時注意不要將吸頭深入試管底部，也不要用力推導致液體飛濺。
⑧左手將試管口靠近火焰滅菌，移液器吸頭移到酒精燈火焰的另一側。再次灼燒試管口
⑨右手保持握移液器姿勢將試管帽蓋上，將試管歸位。移取液體完畢后，按壓移液器滑動桿使吸頭脫落至廢物缸，移液器放回架子。熄滅酒精燈，將臺面消毒并收拾干凈。
三角瓶液體接種
相對于試管的液體接種培養，三角瓶接種培養的優勢在于通氣效果好。多見于霉菌或一些細菌的復壯培養或者搖床培養等。操作與前面提到的液體試管接種操作基本相同，最后將液體加入三角瓶的時候，三角瓶傾斜，移液器吸頭抵在三角瓶的內壁，緩緩將液體加入，避免噴濺和氣泡
液體培養基接種是用接種環、移液器或吸管等工具，將菌體或菌液移至試管、三角瓶等容器中的液體培養基中的一種接種方法。其操作與前面斜面接種基本相同，但應注意：液體培養基試管管口或三角瓶瓶口略向上以免培養液流出；加入菌體時，應使接種環與管內壁輕輕研磨，使菌體擦下，塞好棉塞后，將試管在手掌心中輕輕敲打或輕輕搖晃三角瓶，使菌體混合均勻。
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